7.1.3.41 메피쾃클로라이드(Mepiquat chloride)

가. 시험법 적용범위과일류 등 식품에 적용한다.

나. 분석원리시료를 메탄올로 추출한 후 양이온교환수지 컬럼크로마토그래피로 정제하고 탈메틸화하여 기체크로마토그래프로 측정한다.

다. 장치

1) 기체크로마토그래프-질소․인 검출기(GC-NPD)

2) 탈메틸화 반응장치를 사용한다.

그림 1. 탈메틸화 장치.

라. 시약

1) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 표준원액 : 1-Methyl piperidine을 10% 수산화나트륨이 함유된 헥산에 녹여 직접 사용하거나, 메피쾃클로라이드 표준품 100 mg을 마. 시험용액의 조제 3) 탈메틸화 나) 이하의 과정부터 동일하게 실험한 것을 표준원액으로 한다.

4) 표준용액 : 표준원액을 10% 수산화나트륨이 함유된 헥산에 녹여 적당한 농도로 혼합, 희석한다.

5) 양이온교환수지 : 강산성 50W × 4, H+형, 50～100 메쉬(mesh)

6) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

마. 시험용액의 조제

1) 추출
시료 20 g을 정밀히 달아 삼각플라스크에 넣고 0.5 M 염산 : 메탄올(25 : 75) 혼합액 100 mL를 넣어 30분간 흔들어 섞은 후 여과지가 깔려있는 부흐너깔때기로 감압 여과한다.

2) 정제
컬럼관에 양이온교환수지 12 g을 메탄올을 이용하여 채우고 메탄올 50 mL를 흘려보내 세척한 후 위의 여과액을 5 mL/분의 유속으로 통과시킨 다음 메탄올 100 mL로 유출시켜 버린다. 다시 1.5 M 염산 200 mL를 흘려보내 용출하여 받고, 용출액은 50℃ 이하에서 감압 농축하여 모두 날려버린다. 잔류물은 물 20 mL에 녹이고 10% 수산화나트륨 용액으로 pH를 11～13으로 맞춘 후 0.02% dipicrylamine 함유 디클로로메탄 용액 30 mL를 넣고 강하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨 후 디클로로메탄층을 취한다. 물층에 다시 0.02% dipicrylamine 함유 디클로로메탄 용액 30 mL를 넣고 위와 같이 2회 되풀이한 후 위의 디클로로메탄층에 합한다. 디클로로메탄층은 40℃ 이하에서 감압 농축하여 모두 날려버리고 잔류물을 2 M 염산 50 mL에 녹여 분액깔때기로 옮긴 후 디클로로메탄 10 mL씩으로 2회 세척한다. 물층은 50℃ 이하에서 감압 농축하여 모두 날려버린다.

3) 탈메틸화

가) 탈메틸화 장치의 포집용 눈금시험관(그림 참조)에 헥산 2.5 mL를 넣고 드라이아이스/메탄올 냉각제 안에서 냉각시킨다.

나) 잔류물은 디에탄올아민 3 mL와 Hexamethylphosphoramide(HMPA) 2 mL를 가한 후 탈메틸화 장치에 장착하여 190～200℃로 가열하면서 90분간 질소가스를 1 기포/초의 속도로 통과시킨다.

다) 반응이 끝난 후 시험관 도입부를 헥산 1 mL로 세척하여 헥산이 3.5 mL가 되게 하고 10% 수산화나트륨 용액 1 mL를 넣은 다음 30초간 강하게 흔들어 섞어 세척한다. 헥산층을 취하여 10% 수산화나트륨 용액 0.5 mL를 넣고 30초간 흔들어 섞은 후 시험용액으로 한다.

바. 시험조작

1) 기체크로마토그래프의 분석조건

가) 컬럼 : DB-WAX 캐필러리 컬럼(30 m × 0.25 mm) 또는 이와 동등한 것

나) 이동상가스 및 유속 : 질소(N2), 1 mL/분

다) 오븐 온도 : 120℃

라) 주입부 온도 : 250℃

마) 검출기 온도 : 270℃

2) 검량선의 작성
표준용액을 농도별로 일정량 취하여 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

3) 정량한계
0.05 mg/kg

사. 정성시험위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 어느 분석조건에서도 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.

아. 정량시험정성시험과 같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.