9.7.4 기체크로마토그래피/질량분석기에 의한 확인시험

가. 시험법 적용범위

불검출 기준 적용대상 이외의 식품

나. 분석원리

검체 중의 멜라민을 아세토니트릴․물(50:50, v/v) 용액으로 추출하고 이를 양이온교환수지를 사용하여 정제한 후 유도체화시켜 기체크로마토그래프/질량분석기로 분석한다.

다. 장치

1) 기체크로마토그래프/질량분석기(GC/MS)

라. 시약 및 시액

1) 표준용액

9.7.3 액체크로마토그래피에 의한 시험 라. 시약및 시액 4) 표준용액을 사용한다.

2) 피리딘 : 특급을 사용한다.

3) 유도체시약(BSTFA)

N,O-Bis(trimethylsilyl) trifluoroacetamide (1% trimethyl-chlorosilane 함유)를 사용한다.

마. 시험용액의 조제

1) 추출 및 정제

9.7.3 액체크로마토그래피에 의한 시험 마. 시험용액의 조제 1) 추출 및 2) 정제에 따라*까지 시험하여 용출액으로 사용한다.

2) 유도체화

표준용액 및 위의 용출액 200 μL를 각각 바이알(Vial)에 넣은 다음 70℃에서 질소로 건고한다. 잔류물에 피리딘 200 μL와 유도체시약(BSTFA) 200 μL를 넣고 마개를 닫은 후 70℃에서 30분간 방치한 것을 확인시험용 표준용액 및 시험용액으로 한다.

바. 시험조작

1) 기체크로마토그래프/질량분석기의 측정조건

가) 칼럼 : DB-5MS(0.25 mm × 30 m, 0.25 μm) 또는 이와 동등한 것

나) 주입부 온도 : 250℃

다) 검출기 온도 : 250℃

라) 오븐온도 : 초기 온도 75℃에서 1분간 유지하고 15℃/분의 비율로 300℃까지 온도를 상승시켜 2분간 유지한다.

마) 운반기체(carrier gas) 및 유량 : 헬륨 (1.0 mL/분)

바) 주입방법 : splitless

사) 주입량 : 1 μL

아) 이온화 방법 : EI mode

자) 이온화 전압 : 70 V

사. 정성시험

위 조건으로 얻어진 시험용액 크로마토그램상의 피크는 표준용액 피크의 머무름 시간과 비교하여 일치 여부를 확인한다. 시험용액의 특성이온이 아래 표와 같이 확인되어야 하고 표준용액과 시험용액 이온간 반응세기의 비(m/z 327 이온에 대한 각 이온의 백분율, response ratio)를 비교하여 그 비가 ± 10% 이내에서 일치하여야 한다.

물 질	이 온
멜 라 민	342 343 344 327	(M) (M+1) (M+2) (M-15)