2.2.1.9 요오드

가. 이온-선택 전극법

1) 시험법 적용범위

영아용조제식, 성장기용조제식, 조제유류에 적용한다.

2) 장치

가) 전극：요오드 전극, 기준 전극(Ag/AgCl전극)

나) pH 측정기

다) 자석 교반막대

라) 여과지(Whatman. 541)

3) 시약 및 시액

가) 3%(v/v) 초산 용액：빙초산 15 mL를 물로 희석하여 500 mL가 되게 한다.

나) 전극 보관 용액：요오드 표준원액을 물로 희석하여 0.1 mL/L가 되게 한다. 요오드 전극을 이 용액에 담가서 보관하며 매주 새 용액으로 교환한다. 차광보관하며, 3개월간 보존 가능하다.

다) 이온강도 조절액(5 M 질산나트륨용액, ISA：ionic strength adjuster) 질산나트륨 42.5 g을 물에 녹여 100 mL로 한다.

라) 2 M 질산니켈용액：질산니켈․6 수화물 58.2 g을 물에 녹여 100 mL가 되게 한다.

마) 요오드 표준용액

(1) 요오드 표준품(요오드 12.69 g/L, 0.1M)：요오드화나트륨 또는 요오드화칼륨 표준품을 사용한다. 실온에서 차광 보관하며, 개봉 후 6개월간 보존 가능하다.

(2) 요오드 표준원액：요오드 표준품 8 mL를 물로 희석하여 1 L가 되게 한다(101.5 μg/mL). 차광하여 보존하며 2주간 사용 가능하다.

(3) 요오드 표준용액 Ⅰ：요오드 표준원액 5.0 mL를 물로 희석하여 500 mL가 되게 한다(1 μg/mL). 차광하여 보존하며 2주간 사용 가능하다.

(4) 요오드 표준용액 Ⅱ：요오드 표준용액 I을 물로 10배 희석한다. 차광하여 보존하며 2주간 사용 가능하다(0.1 μg/mL).

(5) 기지의 첨가 표준용액：요오드 표준원액 (2) 10.0 mL를 물로 희석하여 1 L가 되게 한다. 이 액 100 mL에 이온강도조절액(ISA), 2 M 질산니켈 용액, 물을 각각 1.0 mL씩 첨가한 후 잘 혼합한다. 사용시 조제한다.

4) 시험용액의 조제

검체 100 mL(분말의 경우 10% 수용액)를 250 mL 메스플라스크에 넣고 3% 초산용액 10 mL를 가한 후 물로 정용한다. 이 액을 여과하고 처음 10 mL는 버린다.

5) 시험방법

가) 기기 측정조건

(1) 전극 기울기 체크

전극을 요오드 표준용액 Ⅱ 100 mL에 담그고 ISA, 2 M 질산니켈 용액, 물을 각각 1.0 mL씩 가하고 약 2～5분 후 reading 전위계가 안정되었을 때 E1값을 측정한다. 전극을 물로 씻고 건조시킨 후 요오드 표준용액 Ⅰ 100 mL에 담그고 ISA, 2 M 질산니켈 용액, 물을 각각 1.0 mL씩을 가하고, 약 2～5분 후 reading 전위계가 안정되었을 때 E2 값을 측정한다. 전극을 물로 씻고 건조시킨다. 전극의 기울기(S)는 E2-E1로 계산된다. 매 4시간마다 기울기를 측정하며, 직전에 측정한 기울기를 사용하여 요오드 함량을 계산한다.

(2) 측정

시험용액 100.0 mL를 비커에 넣고 자석 교반막대로 저어주면서 ISA, 2 M 질산니켈 용액, 진한 질산을 각각 1.0 mL씩 가하고 전극을 담근 후 약 2분 후 reading 전위계가 안정되었을 때 E3 값을 측정한다. 이 액에 즉시 기지의 첨가 표준용액 10.0 mL를 가하고 약 2～5분 후 reading 전위계가 안정되었을 때, E4 값을 측정한다.

6) 계산방법

검체 중의 요오드 함량(C) 계산은 다음과 같다.

C(μg/100 g) ＝ Q×0.9854×V×100

Q ＝ 0.0885/{antilog[(E4-E3)/S]-0.912}

0.9854：기지의 첨가 표준용액의 요오드 농도(μg/mL), V：희석 배수, S：E2-E1

0.0885：표준용액 첨가 mL수/(표준용액 첨가 전 총 mL수＋표준용액 첨가 mL수)＝ 10/(103+10)

0.912：표준용액 첨가 전 총 mL수/(표준용액 첨가 전 총 mL수＋표준용액 첨가 mL수) ＝ 103/(103＋10)

나. 유도결합플라즈마-질량분석법(제2법)

1) 시험법 적용범위

영아용 조제식, 성장기용 조제식, 조제유류 등에 적용한다.

2) 장치

유도결합플라즈마-질량분석기(ICP-MS)

3) 시약 및 시액

가) 표준물질 : 요오드화칼륨(potassium iodide, KI, 분자량 : 166)

나) 5% 수산화칼륨(KOH) : KOH를 25 g 취하여 증류수로 녹여 500 mL로 정용한다.

다) 안정화용액(10% NH4OH, 1% Na2S2O3) : Na2S2O3를 5 g 취하여 소량의 증류수로 용해한 후 NH 4OH를 50 mL 첨가한다. 증류수로 희석하여 500 mL로 정용한다.

라) 희석용액(0.5% KOH, 0.2% NH4OH, 0.02% Na2S2O3) : KOH 10 g과 Na2S2O3을 0.4 g 취해 소량의 증류수로 용해한다. NH 4OH를 4 mL 첨가한 후 증류수로 희석하여 2 L로 정용한다.

마) 세척용액(1% NH4OH, 0.1% Triton X-100) : Triton X-100을 2 g 취하여 소량의 증류수로 용해한 후 NH4OH를 20 mL 첨가하고 증류수로 희석하여 2 L로 정용한다.

바) 컨디셔닝 용액(0.5% KOH) : 5% KOH를 25 mL 취한 후 증류수로 희석하여 250mL로 정용한다. ICP-MS 분석 전 기기 안정화에 사용한다.

사) 표준원액 : 표준물질(순도 99% 이상)을 증류수에 녹여 요오드로써 1,000 mg/L가 되도록 조제한다.(요오드화칼륨 130.7 mg을 증류수로 100 mL에 녹여 조제한다.)

아) 표준용액 : 표준원액을 0.5 mL 취한 후 안정화용액을 5 mL 첨가하고 증류수로 희석하여 50 mL로 정용하여 10 mg/L로 조제한다. 이 액을 2.5 mL 취한 후 안정화용액을 5 mL 첨가하고 증류수로 희석하여 50 mL로 정용하여 500 µg/L의 표준용액을 조제한다.(사용 시 제조)

자) 검량곡선 표준용액 : 표준용액을 0.1, 1, 2, 3, 4, 5 mL 취한 후 50 mL로 정용하여 1 ∼ 50 µg/L로 하여 검량곡선을 위한 표준용액으로 사용한다.(사용 시 제조)

4) 시험 용액의 조제

균질화한 검체 0.5 g(액상 2 g)을 50 mL 튜브에 정확히 칭량하고, 증류수를 10 mL 첨가하여 시료를 용해한다. 5% 수산화칼륨 용액을 5 mL 첨가한 후 105 ± 5℃ 오븐에서 1시간 동안 가열 분해한다. 분해가 끝난 후 실온으로 냉각하고, 안정화용액을 1 mL 첨가한 후 증류수로 씻어내어 50 mL로 정용한다. 0.45 µm 멤브레인 필터로 여과한 후 희석용액을 이용하여 1/2 희석한 것을 시험용액으로 한다.

5) 시험방법

가) 유도결합플라즈마-질량분석기 조건

ICP-MS를 이용한 측정 조건은 장비에 따라 최적화하여 사용한다.

나) 검량선 작성

검량곡선표준용액과 시험용액을 각각 주입하여 얻어진 시그널 값을 이용하여 검량선을 작성한다.

다) 정량한계 : 0.80 µg/L

6) 계산 방법

요오드 함량(µg/100 kcal) =

Y' : 검량곡선에 대입하여 얻은 시험용액의 농도(µg/L)

V : 시료 추출에 사용된 용액의 부피(L)

S : 시료 채취량(g)

D : 시험 용액의 희석 배수