4.14.2 정량시험법

가. 균수 측정

검체 25 g 또는 25 mL를 취하여 225 mL의 희석액을 가한 후 1∼2분간 저속으로 균질화 한 후 10배 단계 희석액을 만든다. 시험용액 및 단계별 희석액 1 mL씩을 2매 이상의 멸균 페트리접시에 무균적으로 분주하고, 43～45℃로 유지한 난황을 첨가하지 않은 TSC 한천배지(배지41) 10∼15 mL를 가하여 좌우로 돌리면서 잘 혼합한 후 응고시킨다. 응고된 배지 위에 다시 동일한 배지 10 mL를 가하여 중첩시킨 후 35∼37℃에서 24±2 시간 혐기 배양한다. 검체를 가하지 아니한 동일 희석액 1mL을 대조시험액으로 하여 시험조작의 무균여부를 확인한다. 150개 이하의 전형적인 검은색 집락이 확인된 평판을 선별하여 각 집락수를 계수한다.

나. 확인시험

계수한 평판에서 5개 이상의 전형적인 집락을 선별하여 보통한천배지(배지8)에 접종하고 35∼37℃ 에서 18∼24 시간 혐기배양한 후 4.14.1 정성시험법 다. 확인시험에 따라 실시한다.

다. 균수계산

확인 동정된 균수에 희석배수를 곱하여 계산한다. 예로 10-4에서 평균집락수가 85개이었고, 이 중 5개의 집락을 확인한 결과 4개의 집락이 클로스트리디움 퍼프린젠스로 동정되었을 경우 85×(4/5)×10,000=680,000으로 계산한다.