7.1.2.13 니코설퓨론(Nicosulfuron), 포람설퓨론(Foramsulfuron), 모노설퓨론(Monosulfuron), 옥사설퓨론(Oxasulfuron), 티펜설퓨론메틸(Thifensulfuron-methyl), 메트설퓨론메틸(Metsulfuron-methyl), 시노설퓨론(Cinosulfuron), 설포메튜론메틸(Sulfometuron-methyl), 트리아설퓨론(Triasulfuron), 림설퓨론(Rimsulfuron), 클로르설퓨론(Chlorsulfuron), 아미도설퓨론(Amidosulfuron), 에타메트설퓨론메틸(Ethametsulfuron-methyl),오르토설파뮤론(Orthosulfamuron), 메소설퓨론메틸(Mesosulfuron-methyl),아짐설퓨론(Azimsulfuron), 트리플록시설퓨론(Trifloxysulfuron), 설포설퓨론(Sulfosulfuron), 플루세토설퓨론(Flucetosulfuron), 벤설퓨론메틸(Bensulfuron-methyl), 플라자설퓨론(Flazasulfuron), 이마조설퓨론(Imazosulfuron), 트리베뉴론메틸(Tribenuron-methyl), 아이오도설퓨론메틸나트륨(Iodosulfuron-methyl-sodium), 플루피르설퓨론메틸(Flupyrsulfuron-methyl), 프로피리설퓨론(Propyrisulfuron), 메타조설퓨론(Metazosulfuron), 프로설퓨론(Prosulfuron), 피라조설퓨론에틸(Pyrazosulfuron-ethyl), 트리토설퓨론(Tritosulfuron), 에톡시설퓨론(Ethoxysulfuron), 클로리뮤론에틸(Chlorimuron-ethyl), 할로설퓨론메틸(Halosulfuron-methyl), 트리플루설퓨론메틸(Triflusulfuron-methyl), 프리미설퓨론메틸(Primisulfuron-methyl), 사이클로설파뮤론(Cyclosulfamuron)

가. 시험법 적용범위곡류, 서류, 두류, 과일류, 채소류 등의 식품에 적용한다.

나. 분석원리시료를 포름산 함유 아세토니트릴로 추출한 후 d-SPE(dispersive-Solid Phase Extraction)로 정제하여 액체크로마토그래프-질량분석기로 분석한다.

다. 장치

1) 액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)

라. 시약 및 시액

1) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 특급

2)물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

3)표준원액 : 니코설퓨론, 포람설퓨론, 모노설퓨론, 옥사설퓨론, 티펜설퓨론메틸, 메트설퓨론메틸, 시노설퓨론, 설포메튜론메틸, 트리아설퓨론, 림설퓨론, 클로르설퓨론, 아미도설퓨론, 에타메트설퓨론메틸, 오르토설파뮤론, 메소설퓨론메틸, 아짐설퓨론, 트리플록시설퓨론, 설포설퓨론, 플루세토설퓨론, 벤설퓨론메틸, 플라자설퓨론, 이마조설퓨론, 트리베뉴론메틸, 아이오도설퓨론메틸나트륨, 플루피르설퓨론메틸, 프로피리설퓨론, 메타조설퓨론, 프로설퓨론, 피라조설퓨론에틸, 트리토설퓨론, 에톡시설퓨론, 클로리뮤론에틸, 할로설퓨론메틸, 트리플루설퓨론메틸, 프리미설퓨론메틸, 사이클로설파뮤론 표준품을 각각 아세토니트릴에 녹여 1,000 mg/L가 되게 한다.

4)표준용액 : 표준원액을 무처리 시료 추출물을 이용하여 적당한 농도로 혼합, 희석한다.

5)d-SPE : 무수황산마그네슘
(MgSO4,anhydrous magnesium sulfate), C 18(octadecyl bonded silica)

6)기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

마. 시험용액의 조제

1) 추출
시료 5 g을 정밀히 달아 50 mL 원심분리관에 넣고(곡류 및 두류 등 건조검체의 경우 물 5 mL를 넣고 30분간 방치) 0.1% 포름산 함유 아세토니트릴 20 mL를 넣어 10분간 강하게 흔들어 추출한다. 추출물에 무수황산마그네슘 4 g과 염화나트륨 1 g을 넣어 1분간 흔들고 4℃, 4,000 G에서 10분간 또는 이와 동등한 조건에서 원심분리하여 상층액 1 mL를 취한다.

2) 정제
무수황산마그네슘 150 mg과 C 1825 mg이 미리 담겨져 있는 2 mL 원심분리관에 ‘1) 추출’로부터 얻은 상층액 1 mL를 넣고 30초간 와류교반기 등을 이용하여 강하게 흔들어 섞은 다음 이를 원심분리 등의 방법으로 층을 분리한다. 정제된 상층액을 멤브레인 필터(Nylon, 0.2 μm)로 여과한 후 시험용액으로 한다.

바. 시험조작

1) 액체크로마토그래프 분석조건

가) 컬럼 : C18계 역상 컬럼 또는 이와 동등한 것

나) 컬럼 온도 : 40℃

다)이동상

(1)이동상 A : 0.1% 포름산 함유 아세토니트릴

(2)이동상 B : 0.1% 포름산 및 5 mM 포름산암모늄 함유 물

(3) 농도구배조건

시간(분)	A(%)	B(%)
0.0	30	70
1.0	30	70
5.0	50	50
9.0	90	10
11.0	90	10
11.1	30	70
15.0	30	70

라)이동상 유속 : 0.3 mL/분

마)주입량 : 2 μL

2)질량분석기 분석조건

가)이온화 방법 : ESI positive-ion mode

나)Capillary voltage : 5.5 kV

다)Collision gas : 아르곤(Ar)

라)액체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한특성이온

분석성분 (Compound)	머무름 시간 (min)	분자량 (MW)	관측질량 (Exact mass)	선구이온 (Precursor ion,m/z)	생성이온(Product ion,m/z)	충돌에너지 (Collision energy, eV)
니코설퓨론 (Nicosulfuron)	3.8	410.4	410.1	411	1821)	25
					106	53
포람설퓨론 (Foramsulfuron)	4.2	452.4	452.1	453	2721)	19
					182	31
모노설퓨론 (Monosulfuron)	4.5	337.3	337.0	338	1361)	47
					110	47
옥사설퓨론 (Oxasulfuron)	4.7	406.4	406.0	407	1501)	37
					107	67
티펜설퓨론메틸 (Thifensulfuron- methyl)	4.8	387.4	387.0	388	1671)	21
					205	39
메트설퓨론메틸 (Metsulfuron- methyl)	5.1	381.4	381.0	382	1671)	23
					77	81
시노설퓨론 (Cinosulfuron)	5.2	413.4	413.1	414	1831)	25
					83	59
설포메튜론메틸 (Sulfometuron- methyl)	5.5	364.4	364.0	365	1501)	23
					107	63
트리아설퓨론 (Triasulfuron)	5.6	401.8	401.0	402	1671)	25
					141	35
림설퓨론 (Rimsulfuron)	5.7	431.4	431.0	432
					1821)	35
					325	23
클로르설퓨론 (Chlorsulfuron)	5.7	357.8	357.0	358
					1411)	25
					167	25
아미도설퓨론 (Amidosulfuron)	5.8	369.4	369.0	370
					2611)	21
					218	33
에타메트설퓨론메틸 (Ethametsulfuron-methyl)	6.0	410.4	410.1	411	1961)	23
					168	45
오르토설파뮤론 (Orthosulfamuron)	6.0	424.4	424.1	425	1991)	19
					227	21
메소설퓨론메틸 (Mesosulfuron- methyl)	6.2	503.5	503.0	504	1821)	37
					139	69
아짐설퓨론 (Azimsulfuron)	6.2	424.4	424.1	425	1821)	21
					156	53
트리플록시설퓨론 (Trifloxysulfuron)	6.3	437.4	437.0	438	1821)	27
					83	67
설포설퓨론 (Sulfosulfuron)	6.7	470.5	470.0	471	2111)	21
					261	25
플루세토설퓨론 (Flucetosulfuron)	7.0	487.5	487.1	488	1561)	25
					100	69
벤설퓨론메틸 (Bensulfuron- methyl)	7.1	410.4	410.0	411	1491)	27
					91	77
플라자설퓨론 (Flazasulfuron)	7.2	407.3	407.0	408	1821)	27
					83	77
이마조설퓨론 (Imazosulfuron)	7.2	412.8	412.0	413	1531)	19
					156	27
트리베뉴론메틸 (Tribenuron- methyl)	7.3	395.4	395.0	396	1551)	23
					181	29
아이오도설퓨론메틸나트륨 (Iodosulfuron- methyl-sodium)	7.3	529.2	528.9	508
					1671)	23
					69	139
플루피르설퓨론메틸 (Flupyrsulfuron- methyl)	7.8	465.4	465.0	466	1821)	35
					139	83
프로피리설퓨론 (Propyrisulfuron)	7.8	455.9	455.0	456	2611)	23
					196	21
메타조설퓨론 (Metazosulfuron)	7.8	475.9	475.0	476
					1821)	31
					295	25
프로설퓨론 (Prosulfuron)	7.9	419.4	419.0	420
					1411)	25
					167	25
피라조설퓨론에틸 (Pyrazosulfuron- ethyl)	8.0	414.4	414.0	415	1821)	29
					139	65
트리토설퓨론 (Tritosulfuron)	8.0	445.3	445.0	446	1451)	57
					195	27
에톡시설퓨론 (Ethoxysulfuron)	8.2	398.4	398.0	399	2611)	23
					218	33
클로리뮤론에틸 (Chlorimuron- ethyl)	8.2	414.8	414.0	415	1861)	23
					185	25
할로설퓨론메틸 (Halosulfuron- methyl)	8.2	434.8	434.0	435
					1821)	27
					83	71
트리플루설퓨론메틸 (Triflusulfuron- methyl)	8.4	492.4	492.1	493
					2641)	31
					96	75
프리미설퓨론메틸 (Primisulfuron- methyl)	8.4	468.3	468.0	469
					2541)	29
					199	29
사이클로설파뮤론 (Cyclosulfamuron)	8.6	421.4	421.1	422	2611)	25
					218	39

1)정량이온

3) 정량한계
0.01 mg/kg

사. 정량시험위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

아. 확인시험액체크로마토그래프-질량분석기상의머무름 시간과 특성이온으로 각각의 성분을 확인한다.