7.2.1.1 비에치시(BHC), 린단(Lindane, γ-BHC), 디디티(DDT), 알드린(Aldrin), 디엘드린(Dieldrin), 엔드린(Endrin), 캡탄(Captan), 엔도설판(Endosulfan), 퀸토젠(Quintozene), 다이아지논(Diazinon), 파라티온(Parathion)

가. 시험법 적용범위수삼, 건삼, 홍삼, 인삼농축액, 홍삼농축액 등 식품에 적용한다.

나. 분석원리시료를 아세토니트릴로 추출한 후 플로리실 컬럼크로마토그래피로 정제하여 기체크로마토그래프로 측정한다.

다. 장치

1) 기체크로마토그래프-전자포획검출기(GC-ECD) 및 질소․인 검출기(GC-NPD)

라. 시약 및 시액

1) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 플로리실(Florisil) : 컬럼크로마토그래피용 플로리실(60～100 mesh)을 130℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에 보관하여 사용한다.

4) 여과보조제 : 셀라이트 545(Celite 545) 또는 하이플로슈퍼셀(Hyflo Super Cel) 또는 이와 동등한 것

5) 표준원액 : 비에치시(α, β 및 δ-BHC), 린단(Lindane, γ-BHC), 디디티(p,p'-DDT, o,p'-DDT, p,p'-DDE 및 p,p'-TDE(DDD)), 알드린(Aldrin), 디엘드린(Dieldrin), 엔드린(Endrin), 캡탄(Captan), 엔도설판(α-endosulfan, β-endosulfan 및 Endosulfan sulfate), 퀸토젠(Quintozene), 다이아지논(Diazinon), 파라티온(Parathion)을 각각 헥산 등에 녹여 100 mg/L가 되게 한다.

6) 표준용액 : 표준원액을 각각 헥산에 녹여 적당한 농도로 혼합, 희석한다.

7) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

마. 시험용액의 조제

1) 추출
시료(수삼은 100 g을 정밀히 달고, 건조삼은 10～20 g을 정밀히 달아 이에 물 100 mL를 넣고 약 1시간 방치한다. 인삼농축액은 10～20 g을 정밀히 달아 물 100 mL 및 셀라이트 545 약 10 g을 넣는다.)를 추출 용기에 넣고 이에 아세토니트릴(또는 아세톤) 200 mL를 넣어 5분간 추출한 후 여지가 깔려있는 부흐너깔때기로 여과한다. 수삼 및 건삼의 잔류물은 다시 추출 용기에 넣고 아세토니트릴(또는 아세톤) 100 mL를 넣고 5분간 추출한 후 위와 같이 여과하고 합친 여과액에 아세토니트릴(또는 아세톤)을 넣어 일정량으로 하고 양을 기록한다. 인삼농축액은 부흐너깔때기 위의 잔류물을 아세토니트릴(또는 아세톤) 소량으로 씻고 씻은 액은 여과액에 합쳐 아세토니트릴(또는 아세톤)을 넣어 일정량으로 하고 여과액의 양을 기록한다. 여과액중 시료에 따라 5～10 g에 해당하는 양을 취하여 1,000 mL의 분액깔때기에 넣고 석유에테르 100 mL를 넣어 1분간 강하게 흔들어 섞은 후 이에 포화염화나트륨용액 10 mL 및 물 600 mL를 넣어 다시 1분간 강하게 흔들어 섞고 정치하여 층을 분리시키고 석유에테르층을 다른 분액깔때기에 취한다. 물층에 다시 석유에테르 100 mL를 넣고 위와 같이 되풀이하여 석유에테르층을 위의 분액깔때기에 합쳐 물 100 mL 씩으로 2회 가볍게 흔들어 섞어 씻는다. 석유에테르층을 무수황산나트륨으로 탈수한 후 40℃ 이하에서 감압하여 약 5 mL로 농축한다.

2) 정제
안지름 22 mm의 컬럼관에 플로리실 20 g과 무수황산나트륨 10 g을 각각 헥산에 현탁시켜 충전한 후 그 상단에 소량의 헥산이 남을 정도까지 유출시켜 버린다. 이 컬럼에 위의 농축액을 넣고 15% 에테르 함유 헥산 150 mL로 용출하고 이어서 50% 에테르함유헥산 200 mL로 하여 용출액을 40℃ 이하에서 감압 농축하고 일정량으로 하여 시험용액으로 한다.

바. 시험조작

1) 기체크로마토그래프의 분석조건

가) 컬럼충전제

(1) 고정상담체 : 기체크로마토그래프용 크로모솔브 W(AW-DMCS), 크로모솔브 G(AW-DMCS) 및 가스크롬 Q(60～80 mesh 또는 80～100 mesh) 또는 이와 동등한 것

(2)고정상액체 : 기체크로마토그래프용 5% DC-11, 2% OV-17, 2% DEGS+0.5% 인산, 2% QF-1, 2% PEGA, 2% DC-200+0.2% 에폭시수지 1009, 5% OV-17, 5% DC-200, 1.5% SE-30+1.5% QF-1, 5% XE-60, 0.5% XE-60 및 3% OV-17+4% QF-1(1 : 4)

나) 컬럼 : 안지름 2～3 mm, 길이 100～200 cm의 유리관 또는 캐필러리컬럼(HP-1, HP-5, HP-608 또는 이와 동등한 것)

다) 주입부 및 검출기의 온도 : 250～300℃

라) 컬럼 온도 : 항온 또는 승온조건

(1) 항온조건의 예 : 180～220℃

(2) 승온조건의 예 : 초기온도 및 시간 120℃, 4분
승온속도 8℃/분 나중온도 및 시간 260℃, 5분

마) 이동상가스 및 유속 : 질소(N2), 1(캐필러리컬럼) 또는 30～50 mL/분(유리관)

2) 검량선의 작성
표준용액을 농도별로 일정량 취하여 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

사. 정성시험컬럼충전제 2개 이상을 선정하여 표준용액 및 시험용액을 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 분석조건에서도 그 머무름 시간(retention time)이 일치하여야 한다.

아. 정량시험정성시험에서 얻어진 결과를 근거로 적절한 컬럼충전제를 써서 기체크로마토그래프를 하여 피크 높이법 또는 피크 면적법에 따라서 정량한다.주1) BHC, 린단, DDT, 알드린, 디엘드린, 엔드린, 엔도설판, 퀸토젠, 다아아지논, 파라티온은 이 방법에 따라 정성 및 정량할 수 있으며,캡탄은 검출 시 ‘7.2.2.1 캡탄’ 시험법에 따라 정량한다.주2) 다이아지논, 파라티온의 측정은 ECD, NPD 모두 사용가능 하나 가능하면 질소․인검출기(NPD)를 사용하는 것이 좋다.주3) 이 실험방법에 따라 실험할 때 기기측정시 크로마토그램의 상태가 좋지 않으면 컬럼 정제 전에 아세토니트릴분배를 병행하면 좋은 효과를 얻을 수 있다.