7.3.1.1 알드린(Aldrin), 디엘드린(Dieldrin), 린단(Lindane, γ-BHC), 디디티(DDT), 엔드린(Endrin), 엔도설판(Endosulfan) 및 헵타클로르(Heptachlor)

가. 시험법 적용범위가금류고기, 가금육, 돼지고기, 말고기, 소고기, 알, 양고기, 염소고기, 유, 포유류고기 등 축산물에 적용한다.

나. 분석원리시료를 석유에테르 또는 헥산으로 추출한 후 플로리실 컬럼크로마토그래피로 정제하여 기체크로마토그래프로 측정한다.

다. 장치기체크로마토그래프 : 전자포획검출기(GC-ECD) 및 질소․인 검출기(GC-NPD)

라. 시약 및 시액

1) 용매：잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물：3차 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 플로리실(Florisil)：컬럼크로마토그래프용 플로리실(60～100 mesh)을 130℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에서 보관하여 사용한다.

4) 셀룰로오스(cellulose)：컬럼크로마토그래프용 미결정 셀룰로오스 분말

5) 활성탄(active carbon)：컬럼크로마토그래프용 다코(Darco) G-60 또는 이와 동등한 것

6) 여과보조제 : 셀라이트 545(Celite 545) 또는 하이플로슈퍼셀(Hyflosuper Cell) 또는 이와 동등한 것

7) 표준원액 : 알드린(Aldrin), 디엘드린(Dieldrin), 린단(Lindane, γ-BHC), 디디티(DDT), 엔드린(Endrin), 엔도설판(Endosulfan) 및 헵타클로르(Heptachlor) 표준품을 각각 헥산에 녹여 100 mg/L가 되게 한다.

8) 표준용액 : 표준원액을 각각 헥산에 녹여 적당한 농도로 혼합, 희석한다.

9) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급
주1) 컬럼크로마토그래프용 플로리실, 셀룰로오스, 활성탄에 대해서는 시험법(다성분 및 단성분 시험법)에 따라 시험할 때 대상 농약이 완전하게 회수되는지 여부를 사용 전에 확인한다.

마. 시험용액의 조제

1) 추출
분쇄한 시료 25～50 g(가능하면 지방 3 g이 추출될 수 있는 양의 시료를 취한다)을 달아 무수황산나트륨 100 g 및 석유에테르 또는 헥산 150 mL를 추출용기에 넣고 2분간 강하게 흔들어 추출한 후 여과보조제를 깔은 흡인 여과기로 여과한다. 잔류물은 다시 석유에테르 또는 헥산 100 mL씩을 넣고 위와 같이 되풀이하여 여과한다. 여과액을 합쳐 무수황산나트륨 컬럼에 통과시켜 탈수하고 다시 컬럼을 소량의 석유에테르 또는 헥산으로 씻은 후 이를 40℃이하에서 감압하에 대부분의 용매를 날려보낸다. 이를 다시 공기를 통하면서 40℃이하에서 용매를 완전히 날려보낸 후 지방의 양을 정확히 달아 기록한다. 주1) 검체가 지방인 경우 적당량을 취하여 약 50℃로 가열하여 지방을 분리한 후 건조여과지로 여과한다.

2) 액․액정제(아세토니트릴 분배)
위의 추출한 지방 3 g 이하를 달아 분액깔때기(Ⅰ)에 넣고 석유에테르을 넣어 지방과의 총량이 15 mL정도가 되게 한다. 이에 석유에테르포화아세토니트릴(petroleum ether saturated acetonitrile) 30 mL를 넣고 1분간 강하게 흔들어 섞은 후 정치하여 아세토니트릴층을 미리 물 650 mL, 포화염화나트륨 40 mL 및 석유에테르 100 mL가 들어 있는 분액깔때기(Ⅱ)에 옮긴다. 분액깔때기(Ⅰ)에 다시 석유에테르포화아세토니트릴(petroleum ether saturated acetonitrile) 30 mL씩을 넣고 위와 같이 2회 되풀이하여 아세토니트릴층을 위의 분액깔때기(Ⅱ)에 합친다. ★ 이를 약 30～45초간 강하게 흔들어 섞은 후 정치하여 석유에테르층을 취한다. 물층에 다시 석유에테르 또는 헥산 100 mL를 넣고 15초간 강하게 흔들어 섞은 후 정치하여 석유에테르층을 위의 석유에테르층과 합친다. 석유에테르층을 물 100 mL 씩으로 2회 가볍게 흔들어 씻고 석유에테르층은 무수황산나트륨컬럼에 통과시켜 탈수하고 다시 컬럼을 석유에테르 30 mL씩으로 3회 씻은 후 이를 40℃ 이하에서 감압하에 약 10 mL로 농축한다. 주2) 이 방법에 의해 정제효과가 떨어지는 시료의 경우는 위의 분배한 아세토니트릴층을 모두 모아 아세토니트릴포화석유에테르 30 mL를 넣고 1분간 강하게 흔들어 섞은 후 물 650 mL, 포화염화나트륨 40 mL 및 석유에테르 100 mL가 들어있는 1 L의 분액깔때기에 넣고 ★ 이후의 조작을 되풀이한다.

3) 컬럼크로마토그래프에 의한 정제
안지름 20 mm의 컬럼관에 플로리실 10 g, 활성탄 : 미결정셀룰로오스분말(1 : 10)의 혼합물 2 g, 다음에 무수황산나트륨 8 g을 각각 헥산에 현탁시켜 차례로 충전한 후 그 상단에 소량의 헥산이 남을 정도까지 유출시켜 버린다. 이 컬럼에 위의 농축액을 넣고 40% 헥산함유벤젠 100 mL를 용출한다. 용출액을 40℃ 이하에서 농축하고 일정량으로 하여 알드린(Aldrin), 디엘드린(Dieldrin), 린단(Lindane, γ-BHC), 디디티(DDT), 엔드린(Endrin), 헵타클로르(Heptachlor)의 시험용액으로 한다. 계속해서 이 컬럼에 20% 헥산함유에테르 100 mL를 넣어 용출한다. 용출액을 40℃ 이하에서 감압 농축하고 일정량으로 하여 엔도설판(Endosulfan)의 시험용액으로 한다.

바. 시험조작

1) 기체크로마토그래프의 분석조건

가) 컬럼충전제

(1) 고정상담체 : 기체크로마토그래프용 크로모솔브 W(AW-DMCS), 크로모솔브G (AW -DMCS) 및 가스크롬 Q(60～80 mesh 또는 80～100 mesh) 또는 이와 동등한 것

(2) 고정상액체 : 기체크로마토그래프용 5% DC-11, 2% OV-17, 2% DEGS＋0.5% 인산, 2% QF-1, 2% PEGA, 2% DC-200＋0.2% 에폭시수지 1009, 5% OV-17, 5% DC-200, 1.5% SE-30＋1.5% QF-1, 5% XE-60, 0.5% XE-60 및 3% OV-17＋4% QF-1(1 : 4)

나) 컬럼 : 안지름 2～3 mm, 길이 100～200 cm의 유리관

다) 주입부 및 검출기 온도 : 200～250℃

라) 오븐 온도 : 180～220℃

마) 이동상가스 및 유속 : 질소(N2), 30～50 mL/분

2) 검량선의 작성
표준용액을 농도별로 일정량 취하여 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

사. 정성시험컬럼충전제 2개 이상을 선정하여 표준용액 및 시험용액을 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 분석조건에서도 그 머무름 시간이 일치하여야 한다.

아. 정량시험정성시험에서 얻어진 결과를 근거로 적절한 컬럼충전제를 써서 기체크로마토그래피를 하여 피크높이법 또는 피크면적법에 따라서 정량한다.