8.3.13 목시덱틴(Moxidectin)

1) 시험법 적용범위

축산물 등에 적용한다.

2) 분석원리

시료 중 목시덱틴을 아세토니트릴로 추출하고 추출액을 C18카트리지로 정제한 후 메틸이미다졸(N-methylimidazole)과 무수트리플루오르초산으로 유도체화한다. 유도체화한 시험용액을 액체크로마토그래프/형광검출기로 분석한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/형광검출기(fluorescence detector)

4) 시약 및 시액

가) 용매: 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것

나) 물: 3차 증류수또는 이와 동등한 것

다) 표준원액: 표준품을 메탄올에 녹여 조제한 용액을 표준원액으로 한다.

라) 표준용액: 표준원액을 잔류허용기준 또는 검출에 적합한 농도가 되도록 메탄올에 녹인 후 각 시험관에 2 mL 취한다. 각각의 시험관은 질소농축하고 5)시험용액 조제의 방법과 같이 유도체화하여 표준용액으로 사용한다.

마) 0.1% 트리에틸아민함유30% 아세토니트릴: 트리에틸아민 0.1 mL와 아세토니트릴 30 mL를 물에 녹여 100 mL가 되게 한다.

바) C18카트리지(500 mg, 6 mL) 또는 이와 동등한 것

사) 기타시약:특급 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

가) 추출․정제

균질화한시료1 g을 원심분리관에 취하고 아세토니트릴 7 mL를넣는다. 시험관을 10분간흔들어 섞은 후 10분간 초음파처리하고 3,000G에서 10분간 원심분리한다. 상층액은 원심분리관에옮기고잔류물에아세토니트릴 5 mL를넣고위의 과정을 반복한다. 상층액을 위의 용액과 합한후 물 10 mL를 넣고 이를 추출액으로 한다. 미리 아세토니트릴 5 mL와 0.1% 트리에틸아민 함유 30% 아세토니트릴 5 mL를 순차적으로 넣어 활성화한 C18카트리지에 추출액을 흡착시킨다.0.1% 트리에틸아민 함유 30% 아세토니트릴 1 mL와 70% 아세토니트릴 1 mL로유출시켜 버리고감압조건에서 약 1분간 건조시킨다. 카트리지에 90% 아세토니트릴 3 mL를넣어대상 성분을용출하여 받은 뒤40℃ 이하에서 질소농축한다.

나) 유도체화

추출․정제액과 표준용액에메틸이미다졸(N-methylimidazole):아세토니트릴(1:1, v/v)혼합액100 μL와무수트리플루오로초산(anhydrous trifluoroacetate):아세토니트릴(1:2, v/v)혼합액150 μL를넣어 녹이고충분히 혼합한 후 시험용액으로 사용한다. 이들 용액은 시험 당일 조제하며,시험용액은 액체크로마토그래프에 주입 전까지 차광되게 하고 유도체화 후 6시간 이내에 분석한다.

7) 시험조작

가) 액체크로마토그래프 측정조건

(1)컬럼:C18(4.0 mm× 125 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상: 94% 아세토니트릴

(3) 유속: 2 mL/분

(4) 측정파장: 여기파장 361 nm, 형광파장 465 nm

(5) 컬럼 온도: 40℃

(6) 주입량: 10 μL

나) 검량선의 작성

유도체화한 표준용액을 농도별로 일정량 취하여 액체크로마토그래프에 주입한다. 얻어진크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 정량한계

축산물, 유: 0.005 mg/kg

그림 1.목시덱틴(3.0분)표준품의 크로마토그램

8) 정성 및 확인

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피크는 어느 측정조건에서도 표준 피크의 머무름 시간과일치하여야 한다.

9) 정량시험

정성시험과 똑같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크 높이법 또는 피크 면적법에 따라정량한다.