7.1.3.35 디티아논(Dithianon)
 
  
 가. 시험법 적용범위곡류, 서류, 두류, 과일류, 채소류 등 식품에 적용한다.
 
  
 나. 분석원리시료를 4% 아세트산 함유 아세토니트릴로 추출하고 d-SPE(dispersive-Solid Phase Extraction)로 정제하여 액체크로마토그래프-질량분석기로 분석한다.
 
  
 다. 장치
 
  
 1) 액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)
 
  
 라. 시약 및 시액
 
  
 1) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 특급
 
  
 2) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것
 
  
 3) 표준원액 : 표준품을 4% 아세트산 함유 아세토니트릴에 녹여 1,000 mg/L가 되게 한다.
 
  
 4) 표준용액 : 표준원액을 무처리 시료 추출물을 이용하여 적당한 농도로 혼합, 희석한다(무처리 시료 추출물 90% 이상 포함).
 
  
 5) d-SPE : C18(octadecyl bonded silica)
 
  
 6) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급
 
  
 마. 시험용액의 조제
 
  
 1) 추출
 시료 5 g을 정밀히 달아 50 mL 원심분리관에 넣고 4 N 염산(곡류 및 두류는 10 mL 넣은 후 20분간 방치하고 서류, 과일류 및 채소류는 1 mL 넣는다)을 넣는다. 여기에 4% 아세 트산 함유 아세토니트릴을 25 mL 넣어 10분간 흔들어 섞고 무수황산마그네슘 4 g과 염화 나트륨 1 g을 넣어 1분간 흔들어 섞는다. 섞은 후 4℃, 4,500 G에서 10분간 또는 이와 동등한 조건에서 원심분리한다.
 
  
 2) 정제
 C18500 mg이 미리 담겨져 있는 15 mL 원심분리관에 ‘1) 추출’로부터 얻은 원심분리 상층액 중 5 mL와 4% 아세트산 함유 아세토니트릴 5 mL를 넣고 1분간 충분히 흔들어 섞은 다음 이를 원심분리 등의 방법으로 층을 분리한 후 상층액을 멤브레인 필터(PTFE, 0.2 μm)로 여과한 후 시험용액으로 한다.
 
  
 바. 시험조작
 
  
 1) 액체크로마토그래프 분석조건
 
  
 가) 컬럼 :C18계 역상 컬럼 또는 이와 동등한 것
 
  
 나) 컬럼 온도 : 40℃
 
  
 다) 이동상
 
  
 (1) 이동상 A : 0.4% 아세트산 및 5 mM 아세트산암모늄 함유 물
 
  
 (2) 이동상 B : 0.4% 아세트산 및 40% 이소프로판올 함유 아세토니트릴
 (3) 농도구배조건
  
 
  
 
   
 
    
 
     
 
 시간(분)
 
 
     
 
 A(%)
 
 
     
 
 B(%)
 
 
    
 
    
 
     
 
 0.0
 
 
     
 
 80
 
 
     
 
 20
 
 
    
 
    
 
     
 
 4.0
 
 
     
 
 70
 
 
     
 
 30
 
 
    
 
    
 
     
 
 7.0
 
 
     
 
 10
 
 
     
 
 90
 
 
    
 
    
 
     
 
 10.5
 
 
     
 
 10
 
 
     
 
 90
 
 
    
 
    
 
     
 
 10.6
 
 
     
 
 80
 
 
     
 
 20
 
 
    
 
    
 
     
 
 13.5
 
 
     
 
 80
 
 
     
 
 20
 
 
    
 
   
 
  
 
  
 라) 이동상 유속: 0.3 mL/분
 
  
 마) 주입량: 2 μL
 
  
 2) 질량분석기 분석조건
 
  
 가) 이온화 방법: ESI negative-ion mode
 
  
 나) Capillary voltage: 2.7 kV
 다) Collision gas: 아르곤(Ar)라) 액체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온 
  
 
   
 
    
 
     
 
 분석성분
 
 (Compound)
 
 
     
 
 분자량
 
 (MW)
 
 
     
 
 관측질량
 
 (Exact mass)
 
 
     
 
 선구이온
 
 (Precursor ion,m/z)
 
 
     
 
 생성이온(Product ion,m/z)
 
 
     
 
 충돌에너지
 
 (Collision energy, eV)
 
 
    
 
    
 
     
 
 디티아논
 
 (Dithianon)
 
 
     
 
 296.3
 
 
     
 
 295.9
 
 
     
 
 296
 
 
     
 
 2641)
 
 
     
 
 22
 
 
    
 
    
 
     
 
 164
 
 
     
 
 28
 
 
    
 
    
 
     
 
 238
 
 
     
 
 23
 
 
    
 
   
 
  
 1)정량이온 
  
 3) 표준품의 크로마토그램
 
  
 
 
  
 그림 1. 액체크로마토그래프-질량분석기에서 표준품의 크로마토그램 예시.
 
  
 디티아논(7.5분)
 
  
 *분석기기 : LC(Thermo scientificⓇ Accela), MS/MS(Thermo scientificⓇ US/TSQ vantage),
 
  
 컬럼(Shiseido Capcell core ADME C18, 2.1 mm I.D. × 100 mm L., 2.7 μm)
 
  
 4) 정량한계
 0.01 mg/kg
 
  
 사. 정량시험위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.
 
  
 아. 확인시험액체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 특성이온으로 디티아논을 확인한다.