.1.3.42 비스피리박소듐(Bispyribac sodium)
가. 시험법 적용범위곡류 등 식품에 적용한다.
나. 분석원리시료를 아세토니트릴로 추출한 후 유도체화하고 플로리실 카트리지로 정제하여 기체크로마토그래프로 측정한다.
다. 장치
1) 기체크로마토그래프-질소․인 검출기(GC-NPD)
라. 시약 및 시액
1) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것
2) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것
3) 플로리실 카트리지(Florisil cartridge) : SPE용 또는 이와 동등한 것
4) 표준원액 : 표준품을 메탄올에 녹여 100 mg/L가 되게 한다.
5) 표준용액 : 표준원액을 일정량 취하여 플라스크에 넣고 실온에서 질소가스를 사용하여 용매를 완전히 날려버린 후 마. 시험용액의 조제 2) 유도체화에 따라 실험하고 벤젠으로 적절한 농도로 혼합, 희석하여 사용한다.
6)유도체시약 : 트리메틸실릴디아조메탄(trimethylsilyl diazomethane)은 특급 또는 이와 동등한 것
7) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급
마. 시험용액의 조제
1) 추출
시료 20 g을 정밀히 달아 용기에 취하고 아세토니트릴 : 물(8 : 2) 혼합액 100 mL를 넣어 5분간 강하게 흔들어 추출한 후 여과지가 깔려있는 부흐너깔때기로 감압 여과한다. 여과액은 분액깔때기에 옮겨 물 400 mL, 포화염화나트륨 용액 50 mL 및 헥산 100 mL를 넣고 강하게 흔들어 섞은 후 정치하여 층을 분리시킨 후 헥산층을 버린다. 다시 물층에 헥산 100 mL를 넣고 위와 같이 되풀이하여 헥산층을 제거한다. 물층에 1 N 염산 1 mL와 디클로로메탄 50 mL를 넣고 강하게 흔들어 섞은 후 정치하여 층을 분리시킨 후 디클로로메탄층을 취하고, 다시 물층에 디클로로메탄 50 mL를 넣고 위와 같이 되풀이한 후 디클로로메탄층을 합한다. 디클로로메탄층은 무수황산나트륨으로 탈수하고 40℃ 이하에서 감압 농축하여 모두 날려버린다. 잔류물은 에틸아세테이트 2 mL에 녹인다.2) 유도체화
위의 녹인 액에 에틸에테르 : 메탄올(8 : 2) 혼합액 1 mL와 트리메틸실릴디아조메탄 0.5 mL를 넣고 마개로 밀봉한 후 실온에서 1시간 방치한다. 반응이 완료된 후 40℃ 이하에서 감압 농축하여 용매를 모두 날려버리고 잔류물은 벤젠 10 mL로 녹인다.3) 정제
미리 20 mL의 벤젠으로 활성화한 플로리실 카트리지에 위의 녹인 액을 넣고 벤젠 20 mL로 유출시켜 버린다. 카트리지를 벤젠 : 에틸아세테이트(8 : 2) 혼합액 30 mL로 용출하여 받아 40℃ 이하에서 감압 농축하고 잔류물은 질소가스를 사용하여 완전히 건조시킨 후 벤젠에 녹여서 일정량으로 한 다음 시험용액으로 한다.바. 시험조작
1) 기체크로마토그래프의 분석조건
가) 컬럼 : DB-5 캐필러리 컬럼(30 m × 0.25 mm) 또는 이와 동등한 것
나) 이동상가스 및 유속 : 질소(N2), 1 mL/분
다) 오븐 온도 : 80℃에서 시험용액을 주입하고 2분간 유지한 후 10℃/분의 비율로 280℃까지 온도를 상승시켜 10분 이상 유지한다.
라) 주입부 온도 : 280℃
마) 검출기 온도 : 280℃
2) 검량선의 작성
표준용액을 농도별로 일정량 취하여 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.3) 정량한계
0.05 mg/kg사. 정성시험위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 어느 분석조건에서도 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.
아. 정량시험정성시험과 같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.