KFDA식품공전




 
 
  

4.4.2 시액

1) 멸균인산완충희석액(Butterfield's Phosphate Buffered Dilution Water)

인산이수소칼륨(KH2PO4) 34 g을 증류수 500 mL에 용해하고 1N 수산화나트륨 175 mL를 가해 pH를 7.2로 조정하고 여기에 증류수를 가하여 1,000 mL로 하여 인산완충용액으로 한다. 이것을 121℃에서 15분간 멸균한 다음 냉장고에 보존한다. 사용시에는 이 원액 1 mL를 취하여 멸균증류수 800 mL에 가하여 희석하고 이것을 멸균인산완충희석액으로 한다.

2) 멸균생리식염수(Saline)

Sodium Chloride 8.5 g에 증류수를 가하여 1,000 mL로 하고 121℃로 15분간 멸균한다.

3) 뉴-만 염색액

테트라클로로에탄(Tetrachloroethane) 40 mL와 에탄올(Ethanol)을 삼각플라스크에 취하고 70℃까지 가온한 후 여기에 메틸렌블루(Methylene blue) 1.0~2.0 g을 가하여 진탕 혼합하여 색소를 용해시킨 다음 냉각시킨다. 여기에 빙초산(glacial acetic acid) 6 mL를 천천히 가한 후 여과시켜 냉암소에 밀봉 저장한다. 염색액을 조제하여 시일이 경과한 것이나 또는 침전물이 생성된 것은 사용해서는 안 된다.

4) BTB-MR 지시약

Bromthymol Blue0.2 g

Methyl Red0.1 g

위의 성분을 95% 에탄올 300 mL에 용해한 후 정제수 200 mL을 혼합한다.

5) 젤라틴 인산완충용액

Gelatin2 g

Disodium Phosphate4 g

위의 성분을 증류수 1,000 mL에 녹이고 pH를 6.2로 조정한 후 121℃에서 15분간 멸균한다.

6) Nitrite 지시약

가) A시약:Sulfanilic acid 1 g에 5N acetic acid 125 mL를 가하여 제조한다.

나) B시약:N-(1-naphthyl)ethylene dihydrochloride 0.25 g에 5N acetic acid 200 mL를 가하여 제조한다.

다) 5N acetic acid ; 빙초산(glacial acetic acid) 28.75 mL에 증류수 71.25 mL를 가하여 제조한다.

A시약 0.5 mL와 B시약 0.2 mL를 각각 반응액에 첨가한 후 관찰결과 적색-보라색을 띄면 양성으로 판정하며, 만일 반응이 없으면 Zn을 소량 첨가하여 색의 변화가 없으면 이를 양성으로 판정한다.

7) 펩톤식염완충액
(Buffered Peptone Water)

Peptone10 g

Sodium Chloride5 g

Disodium Phosphate3.5 g

Monopotassium Phosphate1.5 g

위의 성분을 증류수 1000 mL에 가하여 pH를 7.2±0.2로 조정한 후 121℃에서 15분간 고압 멸균한다.

8)난황액

달걀을 1시간 가량 0.1% Mercury Chloride(HgCl2)에 담근 후 꺼내 70% ethanol에 30분 가량 담궈 놓는다. 달걀을 꺼내 노른자만 취한 후 동량의 멸균생리식염수를 가하여 사용한다.

9) 0.1% Peptone solution

Peptone1.0 g

위의 성분을 증류수 1,000 mL에 녹여 pH 7.0 ± 0.2 로 조정한 후 121℃에서 15분간 멸균한다.

10) Ninhydrin 용액

Ninhydrin 3.5 g을 acetone과 butanol을 1:1로 혼합한 용액 100 mL로 용해하여 사용하며, 냉장보관한다.

11) Ziehl-Neelsen 염색액

(1) Saturated Alcoholic Basic Fuchsin(Stock Solution)

95% Ethyl alcohol 100 mL

Basic fuchsin 3 g

(2) Basic Fuchsin(Working Solution)

Saturated Alcoholic Basic Fuchsin 10 mL

5% Phenol 90 mL

(3) Acid Alcohol

Hydrochloric acid 3.2 mL

95% Ethyl alcohol 97 mL

(4) Brilliant Green Counter stain

Brilliant green 1 g

0.01% NaOH 100 mL

12) 루골솔루션((iodine/potassium iodide solution)

100 g의 potassium iodide을 200∼300 mL의 물에 섞은 후, 50 g의 iodine을 넣고 녹을 때까지 가열해 주어 제조한 후 1 L의 멸균증류수에 넣어 빛이 차단된 용기에 보관한다.

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