폴리감마글루탐산

Poly-γ-glutamic acid

 

정   의  이 품목은 고초균(Bacillus subtilis) 및 고초균의 일종인 Bacillus subtilis chungkookjang을 배양한 다음 배양여액을 막 분리 및 정제하여 얻어지는 물질로서 그 성분은 폴리감마글루탐산이다.

함    량  이 품목은 건조한 다음 정량할 때, 폴리감마글루탐산으로서 95.0% 이상을 함유한다.

성    상  이 품목은 흡습성이 강한 백색의 분말로서 냄새와 맛이 없다.

확인시험  (1) 이 품목 0.1g을 취하여 박층크로마토그래피시험을 할 때, L-글루탐산과 동일한 위치에 적색의 반점이 확인되어야 한다. 시험용액은 이 품목 0.1g을 취하여 물 9.5mL에 용해한 다음 이 액에 0.5mL의 6N 염산을 넣고 110℃, 24시간 가수분해하여 시험용액으로 한다. 필요하면 여과하여 그 여과액을 사용한다. 조제된 시험용액을 다음의 전개조건하에서 전개한다.

    박층크로마토그래피 조건

      전개용매 : n-부탄올•빙초산•물의 혼액 (2 : 1 : 1)

      박 층 판 : 실리카겔

      전개거리 : 10～15cm

      발색시약 : 닌히드린 0.2g을 불포화 n-부탄올에 녹여 100mL로 한다.

   (2) 이 품목 1g을 취하여 적외부흡수스펙트럼측정법 중의 브롬화칼륨정제법에 의해 측정할 때, 카복실기(1,735cm^-1), 아민기(1,554cm^-1) 및 아민기와 연결된 카복실기(1,650cm^-1)가 확인되어야 한다.

순도시험  (1) 비소 : 이 품목을 비소시험법에 따라 시험할 때, 그 양은 4.0ppm 이하이어야 한다.

  (2) 납 : 이 품목 5.0g을 취하여 원자흡광광도법 또는 유도결합플라즈마발광광도법에 따라 시험할 때, 그 양은 10.0ppm 이하이어야 한다.

  (3) 세균수 : 이 품목은 「식품의 기준 및 규격」일반시험법의 미생물시험법 중 세균수(일반세균수)에 따라 시험할 때, 1g당 10,000 이하이어야 한다.

  (4) 대장균 : 이 품목은 「식품의 기준 및 규격」일반시험법의 미생물시험법 중 대장균에 따라 시험할 때, 음성(-)이어야 한다.

건조감량  이 품목 약 3g을 정밀히 달아 105℃에서 3시간 건조할 때, 그 감량은 4% 이하이어야 한다.

강열잔류물  이 품목 약 1g을 정밀히 달아 강열잔류물시험법에 따라 시험할 때, 그 양은 1.0% 이하이어야 한다.

정 량 법  이 품목을 건조한 다음 약 10mg을 정밀히 달아 6N 염산 10mL를 가한 후 110℃에서 24시간 가수분해하여 시험용액으로 한다. 시험용액 일정량을 취하여 아래의 조작조건에 따라 아미노산 분석기를 이용하여 글루탐산 함량을 구한다. 별도로, 산으로 가수분해 하지 않은 A액 일정량을 취하여 아미노산분석기를 이용하여 유리글루탐산 함량(%)을 구한 다음 계산식에 따라 폴리글루탐산 함량(%)을 구한다.

유리글루탐산 함량(%) = 글루탐산량 / 검체채취량 × 100

 

폴리글루탐산함량(%) =	글루탐산량(g)	×	0.88	×	100	-	유리글루탐산의 함량
	검체채취량(g)

 

0.88 =	129(폴리글루탐산 중의 글루탐산 잔기의 분자량)
	147(글루탐산 분자량)

 

    아미노산분석기의 조작조건

      칼    럼 : HR Na column(4.6mm × 200.mm) 또는 이와 동등한 것

      칼럼온도 : 78℃

      검출기 및 파장 : 흡광검출기(570nm)

    이동상 및 유량

      완 충 액 : 구연산리튬완충액(Lithium citrate buffer, pH 2.8)을

                 20mL/h의 유속으로 흘려줌

      반 응 액 : 닌히드린시액을 25mL/h의 유속으로 흘려줌

      반응기 온도 : 135℃

      검체주입량 : 40μL

    시 액

      닌히드린 시액 : 닌히드린(ninhydrin) 18g과 히드린단틴(hydrindantin) 0.7g을 정밀히 달아 디메틸설폭시드 675mL에 녹인다. 이 액에 초산리티움시액(pH 5.2) 225mL을 가한다.