디아스타아제

Diastase(Diastatic Power, DP)

 

정    의  이 품목은 맥아 등에서 얻어진 효소제이다. 다만, 역가조정, 품질보존 등을 위하여 희석제, 안정제 등을 첨가할 수 있다.

  이 품목은 전분의 α-1,4 글루코시드 결합을 가수분해하여 덱스트린, 올리고당 및 단당류를 생성한다.

성    상  이 품목은 백～진한 갈색의 분말, 입상, 페이스트상 또는 무～진한 갈색의 액상이다.

확인시험  이 품목의 활성시험법에 따라 시험할 때 활성을 나타내어야 한다.

순도시험  (1) 비소 : 이 품목을 비소시험법에 따라 시험할 때, 그 양은 4.0ppm 이하이어야 한다.

  (2) 납 : 이 품목 5.0g을 취하여 원자흡광광도법 또는 유도결합플라즈마발광광도법에 따라 시험할 때, 그 양은 5.0ppm 이하이어야 한다.

  (3) 대장균군 : 이 품목은 「식품의 기준 및 규격」 일반시험법의 미생물시험법 중 대장균군에 따라 시험할 때, 제품 1g당 30 이하이어야 한다.

  (4) 살모넬라 : 이 품목은 「식품의 기준 및 규격」 일반시험법의 미생물시험법 중 살모넬라균시험법에 따라 시험할 때, 음성(—)이어야 한다.

  (5) 대장균 : 이 품목은 「식품의 기준 및 규격」일반시험법의 미생물시험법 중 대장균에 따라 시험할 때, 음성(-)이어야 한다.

정 량 법(역가)

  분석원리 : 본 시험방법은 맥아, 기타 효소제의 아밀라아제 역가를 측정하는 방법이다. 역가시험은 pH 4.6, 온도 20℃에서 전분기질의 30분간 가수분해에 근거를 두고 있다. 가수분해에 의해 생성된 환원당류는 알칼리성페리시아나이드를 사용한 적정법에 따라 측정한다.

  시험용액의 조제

    맥아검체 : 검체 30g을 분쇄기를 사용하여 미세하게 간다. 이 분말 25g을 정밀히 달아 1,000mL 삼각플라스크에 옮기고 0.5% 염화나트륨용액 500mL를 가하고 20±0.2℃에서 2.5시간 정치하여 20분 간격으로 조용히 흔들어 주어 침출시킨다(주의 : 거꾸로 흔들어 혼합하지 말 것이며 가능한 한 검체가 기벽에 남는 양을 최소한으로 하여야 한다). 직경 32cm의 왓트만 No. 1 또는 동종의 여지로 직경 20cm 크기의 깔때기를 사용하여 여과하고, 초류액 50mL는 원액에 합하여 여과한다. 깔때기위에 시계접시를 덮고 깔때기 목과 수기 주위에 적당한 덮개를 하여 여과 중에 증발을 막는다. 여과시간이 30분 경과 할 때까지 여액을 받는다. 여액 20mL를 정확히 취하여 0.5% 염화나트륨용액을 가하여 100mL로 한 것을 시험용액으로 한다.

    기타 효소제 : 최종희석액 10mL가 Diastatic power(DP) value 2～150℃를 함유하도록 시험용액을 조제한다.

    시험조작 : 시험용액 10mL를 정확히 취하여 250mL 메스플라스크에 넣고 20±0.2℃에서 미리 30분간 방치하여 항온으로 한 기질용액 200mL를 가하고 시간을 측정한다. 이를 20℃의 수욕조에서 30분간 방치하여 식힌 다음 0.5N 수산화나트륨용액 20mL를 가하고 물을 가하여 250mL로 한다. 이 액 5mL를 125mL 삼각플라스크에 취하여 알칼리성페리시아나이드용액 10mL를 가하고 혼합한다. 끓는 수욕조에서 정확히 20분간 가열한 후 상온으로 냉각시킨다. 이에 A.P.Z.용액 25mL, 요오드칼륨용액 1mL 및 전분시액 2mL를 가하고 혼합한 다음 0.05N 치오황산나트륨용액으로 청색이 완전히 없어질 때까지 적정하고 이 소비 mL수를 S로 한다. 따로, 공시험용 250mL 메스플라스크에 0.5N 수산화나트륨용액 20mL, 시험용액 10mL 및 기질용액 200mL를 넣고 물을 가하여 250mL로 한 액 5mL를 취하여 동일한 방법으로 공시험을 하여 이의 소비 mL수를 B로 한다.

     다음 계산식에 따라 DP°(degrees of diastatic power)로 표시된 효소제의 역가를 구한다.

 

역가[DP°(기제로서)] =	(B—S)	×	23	×	F
					100

 

역가[DP°(기제로서)] =	DP° (기제로)	×	100
			(100-M)

 

23 : 정의의 단위로 환산하는데 요하는 계수

M : 수분함량(%)

F : 희석배수(총희석량/시료무게(g))
 

  역가의 정의 : DP°(degrees of diastatic power)로 표시된 1 Diastase activity unit는 20℃에서 100mL기질을 한 시간 처리할 때 펠링용액 5mL를 환원시키기에 충분한 양의 환원당을 생성하는 시험용액의 5% 용액 0.1mL 중에 함유된 효소의 양이다.

 장    치

    분쇄기(Mill) : 실험실용 분쇄기를 사용한다.

  시    액

    초산염완충액 : 초산나트륨 68g을 1N 초산 500mL에 녹이고 물을 가하여 1,000mL로 한다.

    전    분 : 알파아밀라아제(비세균성)에 명시된 전분을 사용한다.

    기질용액 : 건조물로서 전분 20g을 물 50mL에 분산시켜 끓는 물 750mL에 천천히 넣고 2분간 끓여 식힌 다음 초산염완충액 20mL를 넣고 혼합한다. 이에 물을 가하여 1,000mL로 한다.

    초산—염화칼륨—황산아연용액(A.P.Z.) : 염화칼륨 70g, 황산아연(ZnSO₄·7H₂O) 20g을 물 700mL에 녹이고 빙초산 200mL를 가한 다음 물을 가하여 1,000mL로 한다.

    0.05N 알칼리성페리시아나이드용액 : 페리시안화칼륨(K₃Fe(CN)₆) 16.5g과 탄산나트륨 22g을 물 800mL에 녹이고 물을 가하여 1,000mL로 한다.

    요오드칼륨용액 : 요오드칼륨 50g을 물 50mL에 녹이고 물을 가하여 100mL로 한다. 50% 수산화나트륨용액 2방울을 가한다. 이 액은 무색이어야 한다.

보존기준

  냉암소에서 밀봉 보존하여야 한다.